vestichИзвестия Национальной академии наук Беларуси. Серия химических наукProceedings of the National Academy of Sciences of Belarus, Chemical Series1561-83312524-2342The Republican Unitary Enterprise Publishing House "Belaruskaya Navuka"10.29235/1561-8331-2022-58-1-86-93vestich-709Research ArticleТЕХНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ И ХИМИЧЕСКАЯ ТЕХНОЛОГИЯTECHNICAL CHEMISTRY AND CHEMICAL ENGINEERINGВыделение тромбина методом ультрафильтрацииIsolation of thrombin by ultrafiltrationГлевицкаяТ. А.HliavitskayaТ. A.

Глевицкая Татьяна Александровна – научный сотрудник

ул. Сурганова, 13, 220072, Минск

Hliavitskaya Tatsiana А. – Researcher

13, Surganov Str., 220072, Minsk

thliavitskaya@gmail.comБильдюкевичА. В.BildyukevichA. V.

Бильдюкевич Александр Викторович – академик, доктор химических наук, профессор, директор

ул. Сурганова, 13, 220072, Минск

Bildyukevich Alexandr V. – Academician, D. Sc. (Chemistry), Professor, Director

13, Surganov Str., 220072, Minsk

uf@ifoch.bas-net.byИнститут физико-органической химии Национальной академии наук БеларусиInstitute of Physical Organic Chemistry of the National Academy of Sciences of Belarus2022110320225818693Copyright © Глевицкая Т.А., Бильдюкевич А.В., 20222022Глевицкая Т.А., Бильдюкевич А.В.Hliavitskaya Т.A., Bildyukevich A.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vestichem.belnauka.by/jour/article/view/709

Исследована возможность фракционирования раствора активированного протромбинового комплекса (АПК) методами ультра- и диафильтрации. Для отделения тромбина от высокомолекулярных примесей использовали половолоконную ультрафильтрационную мембрану на основе полиэфирсульфона ПЭС-ПВ-100 (производства ИФОХ НАН Беларуси), последующее концентрирование целевого фильтрата выполняли на мембране из полисульфона ПС-ПВ-20. Установлено, что методы ультрафильтрации подходят для выделения тромбина из АПК. Сравнительный анализ выделенных образцов с коммерческими аналогами коагулогического реагента «Тромбин» показал, что тромбин, выделенный с помощью ультрафильтрации, по своей чистоте не уступает тромбину, выделенному хроматографическим путем.

 

The feasibility of separation of activated prothrombin complex (APC) solution via ultrafiltration was investigated. To separate thrombin from high molecular weight impurities, polyethersulfone hollow fiber ultrafiltration membrane PES-HF-100 (manufactured by Institute of Physical Organic Chemistry of the National Academy of Sciences of Belarus) was used, further concentration of the target filtrate of PES-HF-100 was carried out using polysulfone membrane PS-PV-20. It was found that ultrafiltration methods are suitable for isolation of thrombin from APC. Comparative analysis of prepared samples with commercial analogs of the coagulation reagent “Thrombin” established that thrombin isolated via ultrafiltration is not inferior in purity to thrombin isolated by chromatography.

 

тромбинультрафильтрациядиафильтрациякоагулогическая активностьмембранаполиэфирсульфонthrombinultrafiltrationdiafiltrationcoagulation activitymembranepolyethersulfoneReferencesA safety review of topical bovine thrombin-induced generation of antibodies to bovine proteins / F. A. Ofosu [et al.] // Clinical therapeutics. – 2009. – Vol. 31, N 4. – P. 679–691.Ofosu F. A. [et al.] A safety review of topical bovine thrombin-induced generation of antibodies to bovine proteins. Clinical therapeutics, 2009, vol. 31, no. 4, pp. 679–691.Mann, K. G. The molecular weights of bovine thrombin and its primary autolysis products / K. G. Mann, C. W. Batt // Journal of Biological Chemistry. – 1969. – Vol. 244. – N 23. – P. 6555–6557.Mann K. G., Batt C. W. The molecular weights of bovine thrombin and its primary autolysis products. Journal of Biological Chemistry, 1969, vol. 244, no. 23, pp. 6555–6557.Method of activating prothrombin / Assignee: Immuno Aktiengesellschatft : pat. 5393666 USA, Int.Cl. C 12 N 11/00, C 12 N 11/16, C 12 N 9/00, A 61 K 37/547 ; publ. date: 28.02.1995.Method of activating prothrombin. Pat. 5393666 USА, Int.Cl. C 12 N 11/00, C 12 N 11/16, C 12 N 9/00, A 61 K 37/547. Assignee: Immuno Aktiengesellschatft. dec. 19.05.1993; publ. 28.02.1995.Prothrombin activation during carbon tetrachloride-induced acute liver injury in mice // Thrombosis research. – 2002. – Vol. 106. – N 4–5. – P. 257–261.Prothrombin activation during carbon tetrachloride-induced acute liver injury in mice // Thrombosis research, 2002, vol. 106, no. 4–5, pp. 257–261.Suttie, J. W. Prothrombin structure, activation, and biosynthesis / J. W. Suttie, C. M. Jackson // Physiological Reviews. – 1977. – Vol. 57. – N 1. – P. 1–70.Suttie J. W., Jackson C. M. Prothrombin structure, activation, and biosynthesis. Physiological Reviews, 1977, vol. 57, no. 1, pp. 1–70.Aizawa, P. Large-scale preparation of thrombin from human plasma / P. Aizawa, S. Winge, G. Karlsson // Thrombosis research. – 2008. – Vol. 122. – N 4. – P. 560–567.Aizawa P., Winge S., Karlsson G. Large-scale preparation of thrombin from human plasma. Thrombosis research, 2008, vol. 122, no. 4, pp. 560–567.Le Bonniec, B. F. Thrombin / B. F. Le Bonniec // Handbook of Proteolytic Enzymes. – Academic Press, 2013. – P. 2915–2932.Le Bonniec B. F. Thrombin. Handbook of Proteolytic Enzymes. Academic Press, 2013, pp. 2915–2932.Blood plasma fractionation : pat. 4067863 USА. Int.Cl. C 12 N 9/74. / J. G. Watt ; publ. date: 14.11.1975.Watt J. G. Blood plasma fractionation : Pat. 4067863 USА. Int.Cl. C 12 N 9/74. Publ.: 14.11.1975.Burnouf, T. An overview of plasma fractionation / T. Burnouf // Ann Blood. – 2018. – Vol. 3. – P. 33.Burnouf T. An overview of plasma fractionation. Ann. Blood, 2018, vol. 3, pp. 33.Method for activating prothrombin to thrombin : pat. 5677162 USА. Int.Cl. C 12 N 9/74; C 12 N 7104; C 12 N 7/06; A 61 K 38/48. / J. Zou [et al. ]; publ. date: 14.10.1997.Zou J. [et al.]. Method for activating prothrombin to thrombin Pat. 5677162 USА. Int.Cl. C 12 N 9/74; C 12 N 7104; C 12 N 7/06; A 61 K 38/48. dec. 19.05.1995; publ. 14.10.1997.Способ крупномасштабного производства устойчивой при хранении композиции тромбина терапевтической степени чистоты : пат. 2144081 РФ. МПК. C 12 N 9/74; A 61 K 35/16 / З. Проба [и др.] ; заявл. 21.0.1995; опубл. 10.01.2000.Proba Z. [et al.]. Method for Large-Scale Production of a Storage-Stable Therapeutic Grade Thrombin Composition : Pat. 2144081 РФ. Int.Cl. C 12 N 9/74; A 61 K 35/16. dec. 21.0.1995; publ. 10.01.2000 (in Russian).Activation of pure prothrombin to thrombin with about 30 % to about 40% sodium citrate : pat. 6245548 USА. Int.Cl. C 12 N 9/74; A 61 K 38/48 / H. Ralston [et al.] ; publ. date: 12.06.2001.Ralston H. [et al.]. Activation of pure prothrombin to thrombin with about 30 % to about 40% sodium citrate Pat. 6245548 США. Int.Cl. C 12 N 9/74; A 61 K 38/48. dec. 09.05.2000; publ.12.06.2001.One-stage prothrombin assay and compositions useful therein : pat. 4289498 USА. Int.Cl. C 12 N 9/74. / Ortho Diagnostics, Inc.; publ. date: 1987.Baughman D. J., Lytwyn A. One-stage prothrombin assay and compositions useful therein / Ortho Diagnostics, Inc. : Pat. 4289498 США. Int.Cl. C 12 N 9/74. dec. 1985; publ. 1987.Химическая энциклопедия. – М.: БРЭ, 1992. – 641 с.Knunyants I. L. (ed.). Chemical encyclopedia. Vol. 3. Copper / Polymer. Moscow, Great Russian encyclopedia, 1992. 641 p. (in Russian).Process for producing a virus-inactivated thrombin preparation : pat. 5677162 USА. Int.Cl. C 12 N 9/74. / Connolly C. [et al.] ; 22.06.2006; publ. date: 07.05.2013.Caroline West Research Office CONNOLLY. Process for producing a virus-inactivated thrombin preparation. Patent EP no.1520018B1, 2007.Allary, M. Isolation of human thrombin by affinity chromatography with silicate to be used in the preparation of biological glue / M. Allary, E. Boschetti, J. L. Lorne //Annales pharmaceutiques francaises. – 1990. – Vol. 48. – N 3. – P. 129–135.Allary M., Boschetti E., Lorne J. L. Isolation of human thrombin by affinity chromatography with silicate to be used in the preparation of biological glue. Annales pharmaceutiques francaises, 1990, vol. 48, no. 3, pp. 129–135.Справочник биохимика / Р. Досон [и др.]. – М.: Мир, 1991. – 443 c.Dawson R. M., Elliott D. C., Elliott W. H., Jones K. M. Data for biochemical research. Oxford, Clarendon press, 1986. 580 p.Баркаган, З. С. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза / З. С. Баркаган, А. П. Момот. – М.: Ньюдиамед, 2001. – 285 с.Barkagan Z. S., Momot A. P. Diagnostics and controlled therapy of hemostasis disorders. Moscow, N’yudiamed Publ., 2001. 285 p. (in Russian).Мецлер, Д. Биохимия / Д. Мецлер. – М.: Химия, 1980. – Т. 2. – 609 с.Metzler D. Biochemistry. Moscow, Khimiya Publ., 1980. 609 p. (in Russian).Овчинников, Ю. А. Биоорганическая химия / Ю. А. Овчинников. – М.: Просвещение, 1987. – 816 с.Ovchinnikov Yu. A. Bioorganic chemistry. Moscow, Prosveshchenie Publ., 1987. 816 p. (in Russian).Якубке, Х.-Д. Аминокислоты, пептиды, белки / Х.-Д. Якубке, Х. Ешкайт. – М.: Мир, 1985. – 457 с.Jakubke H.-D., Eshkite H. Amino acids, peptides, proteins. Moscow, Mir Publ., 1985. 457 p. (in Russian).Титов, В. Н. Электрофорез белков сыворотки крови / В. Н. Титов, В. А. Амелюшкина. – М.: Мир, 1994. – 463 с.Titov V. N., Amelyushkin V. A. Serum protein electrophoresis. Moscow, Mir Publ., 1994. 463 p. (in Russian).Suttie, J. W. Prothrombin structure, activation, and biosynthesis / J. W. Suttie, C. M. Jackson // J. Physiological Rev. – 1977. – Vol. 57. – N 1. – P. 1–55.Suttie J. W., Jackson C. M. Prothrombin structure, activation, and biosynthesis. Physiological Reviews, 1977, vol. 57, no. 1, pр. 1–55. https://doi.org/10.1152/physrev.1977.57.1.1Черкасов, А. Н. Мембраны и сорбенты в биотехнологии / А. Н. Черкасов, В. А. Пасечник. – Л.: Химия, 1991. – 240 с.Cherkasov A. N., Pasechnik V. A. Membranes and sorbents in biotechnology. Leningrad, Khimiya Publ., 1991. 240 p. (in Russian).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.