Конструкция и аналитические характеристики новой иммуноферментной системы для обнаружения Listeria monocytogenes в молоке

Разработана тест-система для обнаружения Listeria monocytogenes в культуральной среде, основанная на принципе конкурентного иммуноферментного анализа и имеющая аналитическую чувствительность 1 ∙ 10⁴ КОЕ/мл. Тест-система отличается от известных аналогов (коммерческих и описанных в научных исследованиях) двумя конструктивными особенностями: цитозоль клеток Listeria monocytogenes (мембранно-свободная фракция) иммобилизован на твердой фазе; анализируемым биоматериалом является среда, в которой выращивались бактерии. Адаптация данной тест-системы к иммуноферментному анализу Listeria monocytogenes в молоке выявила выраженный матричный эффект, который не устранялся традиционными методами. При добавлении молока в калибровочные пробы непосредственно перед проведением иммуноферментного анализа сохранена аналитическая чувствительность, равная 1 ∙ 10⁴ КОЕ/мл.

1. Listeriosis – Annual Epidemiological Report for 2022 // European Centre for Disease Prevention and Control. – 2024. – URL: https://www.ecdc.europa.eu/en/publications-data/listeriosis-annual-epidemiological-report-2022 (date of access: 14.10.2025).

2. The epidemiology of Listeria monocytogenes in China / W. Li, L. Bai, P. Fu [et al.] // Foodborne Pathogens and Disease. – 2018. – Vol. 15. – P. 459–466. https://doi.org/10.1089/fpd.2017.2409

3. Listeriosis outbreak in South Africa: a comparative analysis with previously reported cases worldwide / C.-D. K. Tchatchouang, J. Fri, M. de Santi [et al.] // Microorganisms. – 2020. – Vol. 8, № 1. – P. 135. https://doi.org/10.3390/-microorganisms8010135

4. A review of Listeria monocytogenes: an update on outbreaks, virulence, dose-response, ecology, and risk assessments / R. L. Buchanan, L. G. M. Gorris, M. M. Hayman [et al.] // Food Control. – 2017. – Vol. 75. – P. 1–13. https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2016.12.016

5. Commission regulation (EU) 2024/2895 of 20 November 2024 amending Regulation (EC) No 2073/2005 as regards Listeria monocytogenes // Official Journal of the European Union. – 2024/2895. – URL: https://eur-lex.europa.eu/legal-content/EN/TXT/PDF/?uri=CELEX:32024R2895 (date of access: 14.10.2025).

6. Validation of Alternative Analysis Methods – Application to Foodstuffs (NF102). – Iss. on 06-05-2025. – URL: https://nf-validation.afnor.org/wp-content/uploads/2025/05/List-valid-2025-05-06.pdf. (date of access: 14.10.2025).

7. Recent advances in the detection of Listeria monocytogenes / P. Adhikari, N. Florien, S. Gupta, A. Kaushal // Bacterial Infectious Diseases Annual Volume 2023 / eds.: K. Garbacz, T. Jarzembowski. – IntechOpen, 2023. https://doi.org/10.5772/intechopen.109948

8. Development of an internalin-based double-antibody sandwich quantitative ELISA for the detection of Listeria monocytogenes in slaughterhouse environments / Q. Cao, W. Shi, Y. Wei [et al.] // Frontiers in Veterinary Science. – 2025. – Vol. 12. – Р. 1517845. https://doi.org/10.3389/fvets.2025.1517845

9. Detection of Listeria monocytogenes using an immunochromatographic point of care test based on anti-internalin A and B antibodies and a nano-biotinylated detection complex / L. Lopes-Luz, M. Mendonça, M. B. Fogaça [et al.] // LWT – Food Science and Technology. – 2023. – Vol. 188. – Art. 115336. https://doi.org/10.1016/j.lwt.2023.115336

10. Development of a highly specific sandwich ELISA for the detection of Listeria monocytogenes, an important foodborne pathogen / J. Couture, C. Morissette, S. d’Auria, M. Lacroix // Microbiology Research International. – 2014. – Vol. 2, № 4. – P. 46–52. – URL: https://www.netjournals.org/pdf/MRI/2014/4/14-017.pdf (date of access: 14.10.2025).

11. Kiseleva, E. New test system for detection of Listeria monocytogenes in foods by competitive ELISA: features of solid phase preparation and analysis conditions / E. Kiseleva, K. Mikhailopulo, O. Sviridov // Микробные биотехнологии: фундаментальные и прикладные аспекты : материалы XIV Междунар. науч. конф., Минск, 2–7 июня 2025 г. – Мн. : Бел. навука, 2025. – С. 147–149.

12. Kiseleva, E. Detection of Salmonella by competitive ELISA of lipopolysaccharide secreted into the culture medium / E. Kiseleva, K. Mikhailopulo, O. Sviridov // Analytical Biochemistry. – 2025. – Vol. 697. – Art. 115695. https://doi.org/10.1016/j.ab.2024.115695

13. Listeria monocytogenes in food production and food safety: a review / I. O. Adebesin, S. O. Amoka, C. R. Olomoko [et al.] // Journal of Food Science and Nutrition Therapy. – 2024. – Vol. 10, № 1. – P. 057–068. https://doi.org/10.17352/jfsnt.000050