Влияние диметилформамида на пероксидазное окисление тетраметилбензидина и его ингибирование

Аннотация

В смеси фосфатно-цитратного буфера (рН 6,0 и 6,4) с диметилформамидом (ДМФ, 3-30 %) при 20 °С изучена кинетика пероксидазного окисления тетраметилбензидина (ТМБ) и определены кинетические параметры k_cat, константа Михаэлиса K_M и k_cat/ K_M в зависимости от концентрации ДМФ. Показано, что lgk_cat линейно уменьшается с ростом содержания ДМФ, а K_M практически не зависит от него. Изучена кинетика ингибирования окисления ТМБ двумя синтетическими аналогами α-токоферола и определены константы ингибирования K_i, меняющиеся с ростом ДМФ от 15,8 до 3,2 мкМ, что объясняется действием ДМФ на структуру пероксида-зы и ингибиторов, а также их взаимодействие, в котором важная роль принадлежит электростатическим силам, так как lgK_i линейно зависит от (ε-1)/(2ε+1), где ε - диэлектрическая проницаемость среды.