ПОЛУЧЕНИЕ БЕЛКОВЫХ КОНЪЮГАТОВ И МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА ТЕТРАЦИКЛИНА
https://doi.org/10.29235/1561-8331-2018-54-1-72-79
Аннотация
Разработаны методы контролируемой химической модификации бычьего сывороточного альбумина и пероксидазы хрена, позволяющие вводить в белок как минимальное число модификаций для сохранения биологической активности в иммуноанализе, так и максимальное – для получения иммуногенов, а также варьировать линкер и сайт связывания антигена с белком для повышения специфичности иммунного ответа. Получены и охарактеризованы белковые конъюгаты тетрациклина. Проведена иммунизация мышей, выделены моноклональные антитела к тетрациклину, которые испытаны в иммуноферментном анализе тетрациклина. Чувствительность определения составила IC50=5 мкг/мл.
Ключевые слова
При поддержке: Выражаем благодарность доктору Кристоферу Вайзе (Свободный Университет, Берлин) за помощь в снятии и интерпретации масс-спектров.
Об авторах
А. С. Круглик
Институт физико-органической химии Национальной академии наук Беларуси
Беларусь
Беларусь
науч. сотрудник
ул. Сурганова, 13, 220072, Минск
С. Т. Акалович
Республиканский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий
Беларусь
Беларусь
канд. биол. наук, ст. науч. сотрудник
Долгиновский тракт, 160, 220053, Минск
О. Л. Шарко
Институт физико-органической химии Национальной академии наук Беларуси
Беларусь
Беларусь
канд. хим. наук, ст. науч. сотрудник
ул. Сурганова, 13, 220072, Минск
В. В. Шманай
Институт физико-органической химии Национальной академии наук Беларуси
Беларусь
Беларусь
канд. хим. наук, зав. лаб. химии биоконъюгатов
ул. Сурганова, 13, 220072, Минск
Список литературы
1. Synthesis of haptens and development of a sensitive immunoassay for tetracycline residues: Application to honey samples / N. Pastor-Navarro [et al.] // Analytica Chimica Acta. – 2007. – Vol. 594. – P. 211–218.
2. Ahmed, F. E. Analyses of pesticides and their metabolites in foods and drinks / F. E. Ahmed // Trends Anal. Chem. – 2001. – Vol. 20, N. 11. – P. 649–661.
3. Santos, F. J. The application of gas chromatography to environmental analysis / F. J. Santos, M. T. Galceran // Trends Anal. Chem. – 2002. – Vol. 21, N 9–10. – P. 672–685.
4. Sherma, J. Recent advances in the thin-layer chromatography of pesticides: a review / J. Sherma // J. AOAC Int. – 2003. – Vol. 86, N 3. – P. 602–611.
5. Flow Injection Methods of Analysis for Waters. II. Organic Pollutants / A. F. Dunec [et al.] // Crit. Rev. Anal. Chem. – 2003. – Vol. 33, N 1. – P. 57–68.
6. Pico, Y. Capillary electrophoresis for the determination of pesticide residues / Y. Pico, R. Rodriguez, J. Manes // Trends Anal. Chem. – 2003. – Vol. 22, N 3. – P. 133–151.
7. Meulenberg, E. P. Investigation of indicative methods: Validation of several commercial ELISAs for pesticides / E. P. Meulenberg, L. G. de Vree, J. Dogterom // Anal. Chim. Acta. – 1999. – Vol. 399, N 1–2. – P. 143–149.
8. Koester, C. J. Environmental analysis / C. J. Koester, S. L. Simonich, B. K. Esser // Anal. Chem. – 2003. – Vol. 75, N 12. – P. 2813–2829.
9. Richardson, S. D. Water analysis: emerging contaminants and current issues / S. D. Richardson // Anal. Chem. – 2003. – Vol. 75, N 12. – P. 2831–2857.
10. Nistor, C. Bioanalytical tools for monitoring polar pollutants / C. Nistor, J. Emnéus // Waste Management. – 1999. – Vol. 19. – P. 147–170.
11. Preparation of Anti–Tetracycline Antibodies and Development of an Indirect Heterologous Competitive EnzymeLinked Immunosorbent Assay to Detect Residues of Tetracycline in Milk / Yu. Zhang [et al.] // J. Agric. Food Chem. – 2007. – Vol. 55, N 2. – P. 211–218.
12. Burkin, M. A. Improved group determination of tetracycline antibiotics in competitive enzyme–linked immunosorbent assay / M. A. Burkin, I. A. Galvidis // Food and Agricultural Immunology. – 2009. – Vol. 20, N 3. – P 245–252.
13. Органические растворители. Физические свойства и методы очистки / А. Вайсбергер [и др.]. – М.: Изд-во иностр. лит-ры, 1958. – 520 с.
14. Антитела. Методы: в 2 т / Д. Кэтти [и др.]. – М.: Мир, 1991. – Т. 1. – 287 с.
15. Howard, G. C. Basic methods in antibody production and characterization / G. C. Howard, D. R. Bethell. – Boca Raton : CRC Press, 2000. – 271 p.
Рецензия
Просмотров: 840
Послать статью по эл. почте 