Влияние липосомальной формы алтеплазы на эффективность тромболизиса в коронарных артериях при остром инфаркте миокарда

Разработана липосомальная (Лип) форма доставки тканевого активатора плазминогена алтеплазы (АлТ). Изучен количественный и качественный состав липосом, их физико-химические характеристики и протеолитическая активность липосомальной формы тромболитика. Установлено, что состав липосом с соотношением фосфатидилхолин / холестерин 1,5 : 1 и липиды / алтеплаза 1 : 1 является оптимальным для лечения острого инфаркта миокарда (ОИМ) в эксперименте. При различных соотношениях компонентов липосомы имели отрицательное значение дзета-потенциала > 30 мВ, что указывает на их агрегативную устойчивость, в том числе и после хранения в течение 2 суток при 20 °С. Липосомы, полученные из соевого фосфатидилхолина, обладают большей коллоидной устойчивостью (значение дзета-потенциала ~ –57 мВ) и имеют меньшее значение гидродинамического диаметра (~ 140 нм) по сравнению с липосомами из яичного фосфатидилхолина (~ –35,4 мВ и ~ 220 нм соответственно). Исходное содержание «свободной» АлТ липосом в супернатанте из яичного фосфатидилхолина ЛипЯ(АлТ) составило 15,0 ± 4,0 %, в течение периода инкубации (4 суток) концентрация АлТ уменьшается до 9,0 ± 4,5 %. В случае липосом из соевого фосфатидилхолина ЛипС(АлТ) содержание АлТ в течение периода инкубации увеличивается от 11,0 ± 4,5 до 32,5 ± 6,0 %. Значения протеолитических активностей тканевого активатора плазминогена в составе ЛипЯ(АлТ) и ЛипС(АлТ) зависят от типа фосфатидилхолина. Исходная активность АлТ в ЛипЯ(АлТ) составила 36,0 % и через 1 сутки она увеличилась до 45 %, активность АлТ в ЛипС(АлТ) составила 61,0 %, и через 1 сутки увеличилась до 66,0 %. При использовании липосомальной формы доставки алтеплазы в коронарных артериях крыс с ОИМ отмечается более полный лизис фибрина, в отличие от животных, получающих нативную форму препарата. Разработанная система адресной доставки алтеплазы на основе соевых липосом позволяет (p < 0,05) увеличить более чем на 15 % степень восстановления просвета коронарной артерии по сравнению с действием обычного препарата. 

1. Тараховский, Ю. С. Интеллектуальные липидные наноконтейнеры в адресной доставке лекарственных веществ / Ю. С. Тараховский. – М.: Изд-во ЛКИ, 2011. – 280 с.

2. Advanced drug delivery systems for antithrombotic agents / C. F. Greineder [et al.] // Blood. – 2013. – Vol. 122., № 9. – P. 1565–1575. https://doi.org/10.1182/blood-2013-03-453498

3. Nanomedicine as a strategy to fight thrombotic diseases / M. Varna [et al.] // Future Sci. OA. – 2015. – Vol. 1, № 4. – FSO46. https://doi.org/10.4155/fso.15.46

4. Liposomal nanocarriers for plasminogen activators / S. Koudelka [et al.] // J. Controlled Release. – 2016. – Vol. 227, № 10. – P. 45–57. https://doi.org/10.1016/j.jconrel.2016.02.019

5. Liposomes: A Review of Manufacturing Techniques and Targeting Strategies / B. Maherani [et al.] // Curr. Nanosci. – 2011. – Vol. 7, Iss. 3. – P. 436–452. https://doi.org/10.2174/157341311795542453

6. The role of liposomes in clinical nanomedicine development. What now? Now what? / D. J. A. Crommelin [et al.] // J. Controlled Release. – 2020. – Vol. 318. – P. 256–263. https://doi.org/10.1016/j.jconrel.2019.12.023

7. Перспективы применения в клинической практике наноразмерных форм лекарственных препаратов / Ю. М. Краснопольский [и др.] // Рос. хим. журн. – 2012. – Т. 56, № 3–4. – С. 11–33.

8. Получение комплексных препаратов на основе липосомальной формы стрептокиназы и их фармакокинетические характеристики / Е. И. Дубатовка [и др.] // Докл. Нац. акад. наук Беларуси. – 2017. – Т. 61, № 6. – С. 50–57.

9. Экспериментальное изучение физико-химических, фармакокинетических свойств и степени безопасности комплексного препарата стрептокиназы на основе фибрин-специфичных липосом / И. Л. Лутик [и др.] // Кардиология в Беларуси. – 2019. – Т. 11, №. 5. – С. 729–743.

10. Development and characterization of site specific target sensitive liposomes for the delivery of thrombolytic agents / B. Vaidya [et al.] // Int. J. Pharm. – 2011. – Vol. 403, № 1–2. – P. 254–261. https://doi.org/10.1016/j.ijpharm.2010.10.028

11. Fibrinspecific liposomes as a potential method of delivery of the thrombolytic preparation streptokinase / I. E. Adzerikho [et al.] //J. Thromb. Thrombolysis. – 2022. – Т. 53, №. 2. – С. 313–320. https://doi.org/10.1007/s11239-021-02614-0

12. Влияние липосомальной формы стрептокиназы на образование Д-димеров / Е. И. Дубатовка [и др.] // Докл. Нац. акад. наук Беларуси. – 2016. – Т. 60, № 6. – С. 54–58.

13. Bradford, M. M. A rapid and sensitive method for the estimation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / M. M. Bradford // Anal. Biochem. – 1976. – Vol. 72, N 1-2. – P. 248–254. https://doi.org/10.1006/abio.1976.9999

14. Сompton, S.J. Mechanism of dye response and interference in the Bradford protein assay / S. J. Сompton, G. G. Jones // Anal. Biochem. – 1985. – Vol. 151, N 2. – P. 369–374. https://doi.org/10.1016/0003-2697(85)90190-3

15. Efficiency of targeted delivery of streptokinase based on fibrin-specific liposomes in the in vivo experiment / I. E. Adzerikho [et al.] // Drug Deliv. Transl. Res. – 2023. – Т. 13, №. 3. – С. 811–821. https://doi.org/10.1007/s13346-022-01242-2

16. The preparation of human fibrinolysin (plasmin) / J. T. Sgouris [et al.] // Vox. Sang. – 1960. – Vol. 5, N 4. – P. 357–376. https://doi.org/10.1111/j.1423-0410.1960.tb03750.x

17. Temperature-sensitive liposome-mediated delivery of thrombolytic agents / V. Saxena [et al.] // Int. J. Hyperth. – 2015. – Vol. 31, N. 1. – P. 67–73. https://doi.org/10.3109/02656736.2014.991428

18. The use of PEGylated liposomes to prolong circulation lifetimes of tissue plasminogen activator / J.-Y. Kim [et al.] // Biomaterials. – 2009. – Vol. 30, № 29. – P. 5751–5756. https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2009.07.021

19. Wang Y. J., Pearlman R. Stability and Characterization of Protein and Peptide Drugs. Phar-maceutical biotechnology / Y. J. Wang, R. Pearlman. – New York ; London : Plenum press, 1993. – 353 p. https://doi.org/10.1007/978-1-4899-1236-7

20. Шалимов, С. А. Руководство по экспериментальной хирургии / С. А. Шалимов, А. П. Радзиховский, Л. В. Кейсевич. – М. : Медицина, 1989. – 144 с.

21. Thrombus-targeted nanocarrier attenuates bleeding complications associated with conventional thrombolytic therapy / S. Absar [et al.] // Pharm. Res., 2013. – Vol. 30. – P. 1663–1676. https://doi.org/10.1007/s11095-013-1011-x